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高效液相色譜法測(cè)定生物發(fā)酵產(chǎn)品中成分腺苷的含量

更新時(shí)間:2021-06-23      點(diǎn)擊次數(shù):2073

 

高效液相色譜法測(cè)定生物發(fā)酵產(chǎn)品中成分腺苷的含量

 

本方法適用于蟲(chóng)草、菌粉、靈芝等產(chǎn)品系列發(fā)酵產(chǎn)品

1 儀器與試劑

1.1儀器

高效液相色譜儀( LC-500A) SPD-500紫外檢測(cè)器

N2000色譜工作站;

超聲波清洗器,十萬(wàn)分之一天平;

 

1.2試劑                                          

腺苷對(duì)照品含量≥99.0

色譜純甲醇,水為超純水其他為分析純。

 

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱 C18( 150 mm × 4.6 mm,5μm)

流動(dòng)相:甲醇:磷酸鹽緩沖液(pH 6.5 = 101

流速為1.0 ml /min

檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm;柱溫為室溫;進(jìn)樣量為10 μl。

 

2.2 供試品溶液的制備

取擬青霉約1.0g,精密稱(chēng)定,置于50 ml 量瓶,加入20% 甲醇定容至50 ml,密塞,稱(chēng)定重量,超聲20min,放至室溫后稱(chēng)重,用甲醇補(bǔ)足減失的重量。用0. 45 μm 微孔濾膜濾過(guò)后供分析。


                                                                      腺苷標(biāo)準(zhǔn)品譜圖


               擬青霉樣品譜圖

 


                                                        頭孢菌樣品譜圖

3. 液相色譜儀器配置

Pos

Product Number

Qty

1

WK500-0102-002   LC-500A高壓輸液泵

1

2

WK500-1415-004   儀器啟動(dòng)工具包

1

3

WK500-0101-001   SPD-500可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器

1

4

WK500-0413-003   7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥 

1

5

WK500-0401-027   C18 250*4.6

1

6

WK500-1106-002   溶劑托盤(pán)

1

7

WK500-0301-001   色譜工作軟件 

1

8

樣品前處理包

1

(超聲波1臺(tái),真空泵1臺(tái),溶劑過(guò)濾器1套,

濾器、濾膜各2包)

 

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